Визначення соматичних клітин

Для проведення аналізу відбирають 50 мл молока середньої проби, яку можна зберігати у холодильнику при температурі 6—8°С не більше доби.

Методи грунтуються  на відновленні резазурину і метиленового блакитного при розмноженні в молоці чутливих до інгібуючих речовин термофільних стрептококів.

Визначення інгібуючих речовин  з резазурином.

Прилади і реактиви. Автоклав вертикальний або горизонтальний; редуктазник або водяна баня, що забезпечують регулювання температури від ЗО до 50°С; ваги лабораторні другого класу з ціною поділки не більше 0,001 г; термометри скляні рідинні від Одо 100°С; пробірки скляні (висота 150 і діаметр 16 мм); колби мірні на 200 мл; штатив для пробірок,тара скляна на 200 мл; пробки гумові конусні; резазурин за нормативно-технічною документацією; молоко збиране стерильне; тест-культура колекційна (штам Зігеріососсиз іпег-торпііиз); препарат сухий для контролю визначення інгібуючих речовин у молоці за нормативно-технічною документацією; вода дистильована; термостат, що забезпечує температуру в межах 30—50°С з допустими відхиленнями ±ГС від заданої; холодильник побутовий.

Для приготування розчину 0,05%-ної концентрації 100 мг резазурину розчиняють у 200 мл прокип'яченої і охолодженої дистильованої води. Розчин зберігають у склянках з темного скла не більше 20 діб при температурі З—5°С. Колекційну тест-культуру готують так: у пробірку з 10 мл стерильного збираного молока вносять одну петлю культури і витримують у термостаті при 42— 43°С протягом 16—18 год. Колекційну тест-культуру зберігають при температурі 6—8°С до 3 міс, перещеплюючи через 10—14 діб.

Робочу тест-культуру готують з колекційної в пробірках або пляшечках (залежно від необхідної кількості). У пробірку з 10 мл стерильного збираного молока вносять одну петлю колекційної тест-культури 5ігеріососси$ Іпег-торНіІиз або в пляшечку з 100 мл стерильного збираного молока вносять 1 мл тієї ж культури і витримують у термостаті протягом 16—18 год при 42—43"С.

Для проведення аналізу  використовують 1—2-добо-ву культуру при  умові зберігання її у холодильнику при 6—8°С. Напередодні використання робочу культуру перемішують інтенсивним струшуванням.

Посуд, що використовують для приготування і внесення тест-культури, стерилізують. Новий посуд кип'ятять у підкисленій воді протягом 15 хв. Гумові пробки стерилізують в автоклаві при 0,1 МПа протягом 20 хв.

Хід визначення. У чисті  пробірки наливають по 10 мл молока і закривають стерильними гумовими пробками. Решту проби зберігають до кінця аналізу у холодильнику при температурі 6—8°С. Одночасно проводять контрольний аналіз. Для цього у пробірку наливають 10 мл відновленого препарату (СКІР), одержаного розчиненням сухого препарату у флаконі з 10 мл дистильованої води при температурі 50°С.

Пробірки  з дослідним молоком і контрольною  пробою нагрівають на водяній бані до 85—90°С. Потім охолоджують до 43—45°С і стерильною піпеткою у пробірки вносять 0,3 мл робочої тест-культури. Вміст пробірки перемішують триразовим перевертанням і витримують протягом 2 год у редуктазнику або на водяній бані при температурі 42—43°С.

У пробірки з молоком  і контрольною пробою вносять  по 1 мл 0,05%-ного розчину резазурину при температурі 18—20°С. Вміст пробірок перемішують дворазовим перевертанням. Пробірки витримують у редуктазнику або на водяній бані протягом 15 хв при температурі 42—43"С.