Дисбактериоз

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКАЯ  ДИАГНОСТИКА ДИСБАКТЕРИОЗА 

 

• Второй день исследования:

1.Производят  учет роста на среде Эндо. Подсчитывают  общее число выросших колоний  кишечных палочек, обращая внимания  на их характер (цвет, наличие  металлического блеска, диссоциацию,  формы с пониженной ферментативной  активностью). При обнаружении лактозоотрицательных колоний ведут как при выявлении патогенных представителей семейства энтеробактерий.

2.Кровяной, желточно-солевой агар и среду Сабуро извлекают из термостата и оставляют для дальнейшей инкубации при комнатной температуре, а желточно- солевой агар - при действии рассеянного света - для лучшего выявления пигментообразования.

 

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКАЯ  ДИАГНОСТИКА ДИСБАКТЕРИОЗА 

 

 

Третий  день исследования:

1. Производят учет роста УПЭ на среде Симмонса. Помимо УПЭ (представителей родов Цитробактер, Энтеробактер, Клебсиелла, Гафния, наиболее часто выделяемых из фекалий, дающих белые или окрашенные в цвет среды мелкие и средней величины слизистые или сухие колонии, часто в К-форме, изменяющие цвет среды до синего или не изменяющие его; вырастают кишечные палочки, в том числе и с пониженной ферментативной активностью, в виде очень мелких, прозрачных, зеленовато-белых колоний. Подсчитывают общее число колоний УПЭ, выросших на среде Симмонса,делая перерасчет на 1 г. В случае роста на чашке колоний УПЭ несколько типов ведут подсчет каждого из них и соответствующий пересчет на 1 г. фекалий.

Для идентификации  УПЭ производят посев части изучаемой  колонии на скошенном МПА, а другой части- на среду Кларка.

Для более  полной идентификации может быть предложен следующий методический прием - отсев части колоний со среды Симмонса дополнительно на среду Олькеницкого или Клиглера, даст возможность получить информацию еще по четырем признакам, а также определение подвижности и индолообразования.

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКАЯ  ДИАГНОСТИКА ДИСБАКТЕРИОЗА 

 

2.Учитывают  количество колоний стафилококка (подтвержденного изучением морфологии  в окрашенном по Грамму мазке)  на желточно-солевом агаре, делают пересчет на 1 г., определяют пигментообразование и образование лецитиназы (лецитовителлазы) производят отсев колоний для выделения чистой культуры и дальнейшего определения вида стафилококка.

3.Производят  подсчет числа колоний энтерококка  на среде Калины (с пересчетом  на 1 г.), определяют наличие или  отсутствие протеолитической активности.

4.На  кровяном агаре отмечают наличие или отсутствие гемолиза, в положительном случае определяют морфологию микроорганизма; подсчитывают % гемолитических форм к общему количеству выросших на этой среде колоний.

5.Отмечают  наличие черных колоний на  среде Вильсон- Блера подсчитывают их общее количество (с переводом на 1 г.), подтверждают принадлежность выросших микроорганизмов к клостридиям изучением морфологии в окрашенном по Грамму мазке. Нередко на этой среде вырастают представители рода Протеус и Цитробатер, давая колонии, схожие с колониями клостридий.

6.Регистрируют  рост на среде Сабуро с полимиксином, где вырастают дрожжи и дрожжеподобные грибы, давая белые средней величины и крупные колонии. Морфологию микроорганизмов подтверждают микроскопией окрашенных по Грамму препаратов. Определяют общее количество выросших колоний, делаю пересчет на 1 г., а для дифференциации дрожжей от дрожжеподобных грибов рода Кандида делают посев на картофельный или крахмальный агар (для определения филаментации, характерной для грибов рода Кандида и отсутствующей у дрожжей).

 

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКАЯ  ДИАГНОСТИКА ДИСБАКТЕРИОЗА 

 

• Четвертый день исследования:

1.Учитывают  рост бифидобактерий на среде Блаурокка. Для этого из каждой пробирки с ростом готовят мазки, окрашивают по Грамму и микроскопируют.  При микроскопировании препарата отмечается характерная для бифидобактерий морфология и расположение. Учитывают предельное разведение материала, в котором еще регистрируется рост бифидобактерий, подтвержденный нахождением этих микроорганизмов, а окрашенных по Грамму препаратах. При этом, не впадая в большую ошибку, можно перевести предельное разведение материала на количество бифидобактерий на 1 г. фекалий. Допустим, предельным разведением материала, в котором зарегистрирован рост бифидобактерий, подтвержденный изучением морфологии в мазке, было 10¹⁰  . С большой долей вероятности можно считать, что количество бифидобактерий в 1 г. фекалий соответствует 10¹⁰ (пересчет необходим для дальнейшего определения соотношения бифидобактерий и других микроорганизмов).

2.Регистрируют  рост лактобацилл на МРС, подсчитывают общее число колоний этих микроорганизмов, приводят на 1г. Лактобациллы на МРС растут в виде мелких беловато-серых с ровными краями или более крупных желтовато-серых с изъеденными краями колоний, дифференцировать которые от колоний других микроорганизмов не предоставляет особого труда. Лактобациллы довольно хорошо растут на среде Сабуро с полимиксином.

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКАЯ  ДИАГНОСТИКА ДИСБАКТЕРИОЗА 

 

3.Производят  учет бактероидов на КАБах. На этой среде указанные микроорганизмы растут в виде мелких беловато-серых колоний; в мазке - это грамм отрицательные мелкие палочки, расположенные без особого порядка. Делают пересчет для определения количества бактероидов в 1 г. фекалий. Для дифференциации бактероидов от лактобацилл, спорообразующих бактерий и других микроорганизмов производят посев части колонии на КАБ с последующим культивированием в аэробных условиях, а также окраску на выявление спор.

4.Повторно  учитывают рост грибов рода  Кандида на среде Сабуро с полимиксином (при отсутствии роста на этой среде через 24-48 часов); при наличии роста, производят изучение как в п. 6 третьего дня исследования.

5.Для  идентификации УПЭ производят  посев чистой культуры со скошенного  МПА на среду с аминокислотами (лизином, аргином, орнитином), используя для этой цели СИБы (или из набора «Б» для идентификации энтеробактерий) или из набора для индентификации вибрионов.

 

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКАЯ  ДИАГНОСТИКА ДИСБАКТЕРИОЗА 

 

• Пятый день исследования:

1.Производят  учет филаментации (если предварительно были подозрительные колонии на среде Сабуро).

2.Учитывают  тесты, дифференцирующие бактероиды  от лактобацилл и аэробов (по отсутствию роста на МРС и на КАБах в аэробных условиях).

3.Для  индентификации УПЭ производят учет изменений СИБов с аминокислотами, а также результатов реакции Форес- Проскауэра и с метиловым красным, что в ряде случаев даст возможность у становить род и вид; в том случае, когда идентификацию по указанным тестам провести не удается, проводят посев на дополнительные углеводы .

4.Выдача  ответа.

В ответе следует указать количество анаэробов

(бифидобактерий, бактероидов, лактобацилл), а также

количество  аэробных микроорганизмов различных  родов, изолированных на 1 г. фекалий.

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКАЯ  ДИАГНОСТИКА ДИСБАКТЕРИОЗА

 

В заключении следует указать на отсутствие или  наличие дизбактериоза кишечника и степень его выраженности. Основой для заключения должно быть соотношение количества бифидобактерий (как основных представителей анаэробной группы бактерий, выполняющих наиболее важную для организма физиологическую функцию) и аэробов.

При установлении пограничных состояний между  нормой и патологией очень важным показателем является соотношение  между бифидобактериями и Е.соli. Для его установления количество бифидобактерий, определенных в конкретном образце, подтвержденных изучением морфологии в окрашенных по Грамму препаратах, принимают за 100 %, а количество Е.соli- за X. Составляют пропорцию и высчитывают значение. Например, количество бифидобактерий в 1 г =10 , а количество Е. Соli=700 млн.

Составляем  пропорцию: 10¹⁰ -100%

                                           700 млн. - X.

Данный  показатель превышает норму (5%) и  свидетельствует о начальных  сдвигах в микрофлоре (нарушение  соотношения между бифидобактериями и Е.соli), что может быть определено как дизбактериоз I степени. Однако такие расчеты следует проводить не во всех случаях, а только тогда, когда имеются затруднения в дифференциации дизбактериоза I степени и эубиоза.

 

Лечение дисбактериоза

 

Лечение дисбактериоза должно быть комплексным (схема) и включать в себя следующие мероприятия:

• устранение избыточного бактериального обсеменения тонкой кишки;
• восстановление нормальной микробной флоры толстой кишки;
• улучшение кишечного пищеварения и всасывания;
• восстановление нарушенной моторики кишечника;
• стимулирование реактивности организма.

 

Лечение дисбактериоза

 

• Антибактериальные препараты

Антибактериальные препараты необходимы в первую очередь  для подавления избыточного роста  микробной флоры в тонкой кишке.

• Бактериальные препараты

Живые культуры нормальной микробной флоры  выживают в кишечнике человека от 1 до 10% от общей дозы и способны в  какой-то мере выполнять физиологическую  функцию нормальной микробной флоры.

• Регуляторы пищеварения и моторики кишечника

У больных  с нарушением полостного пищеварения  применяют креон, панцитрат и другие панкреатические ферменты. С целью улучшения функции всасывания назначают эссенциале, легалон или карсил, т. к. они стабилизируют мембраны кишечного эпителия.

 

Профилактика  дисбактериоза

 

• Первичная профилактика дисбактериоза представляет очень сложную задачу. Ее решение связано с общими профилактическими проблемами: улучшением экологии, рациональным питанием, улучшением благосостояния и прочими многочисленными факторами внешней и внутренней среды.
• Вторичная профилактика предполагает рациональное применение антибиотиков и других медикаментов, нарушающих эубиоз, своевременное и оптимальное лечение болезней органов пищеварения, сопровождающихся нарушением микробиоценоза.